熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
標準溶液(1000µg/mL,基體:1%HCl)MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)三氟醋柳酸

標準溶液(500mg/L,溶劑：水)Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) XP®Rabbit mAb (PE Conjuga)1-環(huán)己基哌啶

鐠標準溶液(1000μg/ml)TFF1/pS2 (D2Y1J) Rabbit mAb溴-2-氟乙酰

釕標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：2.0mol/L HCl)SPT6 (D6J9H) Rabbit mAb鄰氟甲酸甲酯

銠標準溶液(1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/L HCl)VCAM-1 (D8U5V) Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor®488 Conjuga)氯-2-氟

銣標準溶液(1000μg/ml)LAMP1 (D4O1S) Mouse mAb1-乙基-6,7,8-三氟-1,二氫-氧代喹啉-羧酸

錸標準溶液(1000μg/ml;溶劑：1.5mol/L硝酸)LAMP1 (D4O1S) Mouse mAb氯-吡啶

二氧化硅標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：0.05mol/L NaOH)CD28 (CD28.2) Mouse mAb (FITC Conjuga)1-芐基-1H-吡唑-酸頻哪酯

銀標準溶液(1000μg/ml)c-Jun (60A8) Rabbit mAb (PE Conjuga)十二(烷)酸芐酯基酯

銀標準溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3)SV40 Large T Antigen (D1E9E) Rabbit mAb基酸

鈧標準溶液(1000µg/mL,基體：10%HCL)Ikaros (D6N9Y) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)D-(-)-二甲酯

硒標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：2.0mol/L 硝酸)RIP3 (D8J3L) Rabbit mAb全氟辛基季化物

硒粉/高純硒(100mg/L(20℃),基體:1%HCl)Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjuga)5-氟-2-硝基三氟甲

硅標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：0.05mol/L NaOH)FastScan™ Total Akt1 ELISA KitL-卡內(nèi)

釤標準溶液(1000μg/ml)MHC Class II (I-A/I-E) (M5/114.15.2) Rat mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)6-(10-羥基癸?；?-2,二甲氧基-5-甲酚

二氧化硫標準溶液(100mg/L,溶劑：甲吸收液)CD99 Antibody叔丁氧羰基-L-2,二氨基丁酸

錫標準溶液(1000μg/ml)Phospho-SQSTM1/p62 (Ser349) (E7M1A) Rabbit mAb羥甲基噻唑

錫標準溶液(100μg/mL,基體: 10%HCl)Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb (PE Conjuga)N,N'-二芐基乙二二醋酸
念珠菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒臂板蛋白3A(Sema 3A)ELISA試劑盒IL-7Ra/CD127  白細胞介素-7受體a抗體100 ul

吡哆/吡哆維生素B6酸酶(PDXP)ELISA試劑盒Mitofilin/IMMT  線粒體內(nèi)膜蛋白抗體100 ul

吡哆/吡哆維生素B6激酶(PDXK)ELISA試劑盒ILK-1  整合素連接激酶-1抗體100 ul

鼻病毒(RV)抗體(IgA)ELISA試劑盒ILTV  雞傳染性喉氣管炎病毒抗體100 ul

酸諾龍/酸去甲睪酮(NP)ELISA試劑盒ING1/p33  生長抑制因子基因1抗體100 ul

本周蛋白(BJP)ELISA試劑盒IMP3  胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白3抗體100 ul

胞質(zhì)動力蛋白(CD)ELISA試劑盒Inhibin Alpha  抑制素α抗體20 ul

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA試劑盒Inhibin beta A  抑制素βA抗體100 ul

胞漿型脂酶A2-α(cPLA2-α)ELISA試劑盒Inhibin beta B  抑制素βB抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。