產(chǎn)品名稱：濾紙酶(FPA)試劑盒品牌

規(guī)格：24樣、48樣、

貨號(hào)：GOY-016520

檢測(cè)方法：可見分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類：碳水化合物代謝系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

T7 tag/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgG防御α1(DEFα1)ELISA試劑盒

TFF3 /FITC  熒光標(biāo)記三葉肽因子3抗體IgG芳乙去乙化(AADAC)ELISA試劑盒

TFF2/FITC  熒光標(biāo)記三葉肽因子2抗體IgG芳香(ARO)ELISA試劑盒

TFPI/LACI /FITC  熒光標(biāo)記組織因子途徑抑制劑抗體IgG芳香-N-乙基轉(zhuǎn)移(AANAT)ELISA試劑盒

TFPI-2/FITC  熒光標(biāo)記組織因子途徑抑制劑-2抗體IgG芳烴受體抑制因子(AHRR)ELISA試劑盒

TFR/CD71/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵受體抗體IgG芳犬尿氨甲(AFMID)ELISA試劑盒

CD72/Ly-32/FITC  熒光標(biāo)記CD72抗體IgG芳基硫酯K(ARSK)ELISA試劑盒

CD74(MHC II )/FITC  熒光標(biāo)記CD74抗體IgG芳基硫酯J(ARSJ)ELISA試劑盒

TGF- Alpha /FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–α抗體IgG芳基硫酯I(ARSI)ELISA試劑盒

TGF- Beta1/FITC  熒光標(biāo)記TGF-β1抗體IgG(標(biāo)記抗體)芳基硫酯H(ARSH)ELISA試劑盒

TGF- Beta2 /FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2抗體IgG芳基硫酯G(ARSG)ELISA試劑盒

TGF- Beta3/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3抗體IgG芳基硫酯F(ARSF)ELISA試劑盒

TGF- BetaR1/ALK /FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體1抗體IgG芳基硫酯E(ARSE)ELISA試劑盒

TGF- BetaR 2/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體2抗體IgG芳基硫酯D(ARSD)ELISA試劑盒

TGF- BetaR 3/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體3抗體IgG芳基硫酯B(ARSB)ELISA試劑盒細(xì)胞5-羥色-N-乙轉(zhuǎn)移（Serotonin N-Acetyltransferase）活性20次促狀受體抗體流式免疫組化

比色法定量檢測(cè)試劑盒谷還原

組織5-羥色-N-乙轉(zhuǎn)移（Serotonin N-Acetyltransferase）活性20次阿維菌

比色法定量檢測(cè)試劑盒2′-脫氧尿苷

酵母5-羥色-N-乙轉(zhuǎn)移（Serotonin N-Acetyltransferase）活性20次噻隆

比色法定量檢測(cè)試劑盒D-阿拉伯糖

藍(lán)藻5-羥色-N-乙轉(zhuǎn)移（Serotonin N-Acetyltransferase）活性20次癸吡喃葡萄糖苷

比色法定量檢測(cè)試劑盒油

細(xì)菌5-羥色-N-乙轉(zhuǎn)移（Serotonin N-Acetyltransferase）活性20次氯化亞銅

比色法定量檢測(cè)試劑盒氯化銣

羥吲哚氧轉(zhuǎn)移（hydroxyindole-O-methyltransferase）活性20次季戊四

比色法定量檢測(cè)試劑盒乙鎂

色氨羥化 （Tryptophan Hydroxylase）活性20次鈀

比色法定量檢測(cè)試劑盒ylase）活性20次去氫二異丁香

濾紙酶(FPA)試劑盒品牌鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)2檢測(cè)試劑盒色P450 2W1抗體

趨化因子配體12檢測(cè)試劑盒脫氫抗體

周期依賴性激11檢測(cè)試劑盒因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1

巨噬集落激因子1受體檢測(cè)試劑盒親環(huán)PPIB抗體

盤狀結(jié)構(gòu)域受體家族成員1檢測(cè)試劑盒腫瘤/抗原13抗體

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1檢測(cè)試劑盒鈣反應(yīng)因子抗體

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體4檢測(cè)試劑盒分裂周期2亞型1抗體

視黃檢測(cè)試劑盒20號(hào)染色體開放閱讀框74抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。