產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：阿古尼嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱：Haemophilus agniPCR
編號(hào)：HE31045-R
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
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儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
乙二醇/乙二醇單/乙氧基乙醇/乙基溶纖劑/溶纖劑/2-乙氧基乙醇/乙二醇一/乙二醇獨(dú)/Ethyl glycol 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T) 包裝;1g

正辛胺/辛胺/1-氨基辛烷/氨基辛烷/伯正辛胺/1-辛胺/一正辛胺/胺辛烷/Octylamine 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T) 包裝;5g

七葉苷/馬栗樹皮苷/七葉樹苷/七葉靈/秦皮甲素/七葉靈倍半合物/6-(β-D-吡喃葡糖氧基)-7-羥基-2H-1-苯并呋喃-2-酮/七頁靈/Esculin sesquihydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 包裝;1g

對(duì)氨基二乙基硫酸鹽/4-氨基-N，N-二乙基硫酸鹽/對(duì)氨基-N,N-二乙基硫酸鹽/硫酸對(duì)氨基二乙基/二乙基對(duì)苯二胺硫酸鹽/N,N'-二乙基-1,4-苯二胺硫酸鹽/N,N-二乙基對(duì)苯二胺硫酸鹽/硫酸-4-氨基-N,N-二乙基/TSS 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 包裝;5g

氯化肉豆蔻酰膽堿/Myristoylcholine chloride 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T) 包裝;1g

丁酸酐/ N-丁酸酐/氧化丁酰/丁酐/正丁酸酐/酪酸酐/Butyric anhydride 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 包裝;5g

溴化乙酰膽堿/乙酰基溴化膽堿/溴化乙酰氧基三/乙酰溴化膽堿/2-(乙酰氧基)-N,N,N-*基乙銨溴化物/溴化乙酰氧基*基乙銨/溴化(β-乙酰氧乙)*銨/溴化-O-乙酰膽堿/ACH 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 包裝;1g

1,6-己二胺/己烷二胺/六亞甲基二胺/1,6-二氨基己烷/己基亞甲基二胺/己二胺/己撐二胺/1,6-已二胺/六次甲基二胺/1,6-已烷二胺/1,6-Hexanediamine 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g

鎂粉/鎂/金屬鎂/Magnesium 質(zhì)量規(guī)格：銅用超高靈敏分光光度試劑 包裝;250g

鎂條/鎂/金屬鎂/Magnesium 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T) 包裝;100ml

鎂帶/鎂/金屬鎂/Magnesium 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 包裝;25ml

酸鈣/Calcium iodate 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC) 包裝;1g

過氧化鈣/增氧靈/二氧化鈣/Calcium peroxide 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 包裝;25g

鈦粉/金屬鈦/海綿鈦粉/Titanium 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g

亞麻酸/亞麻油酸/9,12,15-十八碳三烯酸/α-亞麻酸/全順式-9,12,15-十八碳三烯酸/次亞麻子酸/Linolenic acid 質(zhì)量規(guī)格：螯合劑 包裝;250mg

γ-亞麻酸/γ-亞油酸/全順式-6,9,12-十八碳三烯酸/6,9,12-十八碳三烯酸/加莫尼克酸/γ-Linolenic acid 質(zhì)量規(guī)格：螯合劑 包裝;100g

腐殖酸/腐植酸/腐質(zhì)酸/黑腐酸/黃腐酸/HA 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 包裝;25g
阿古尼嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書Fictibacillus│macauensis 中文名稱：澳門假芽孢桿菌種屬:Fictibacillus│macauensis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選； 4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus│badius 中文名稱：栗褐芽胞桿菌種屬:Bacillus│badius分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：≥85%

Bacillus│niacini 中文名稱：煙酸芽胞桿菌種屬:Bacillus│niacini分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Salinispora│arenicola 中文名稱：棲沙鹽孢菌種屬:Salinispora│arenicola分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選； 4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Pelagibaca│bermudensis 中文名稱：百慕大公海橄欖菌種屬:Pelagibaca│bermudensis分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Flavobacterium│sp. 中文名稱：黃桿菌種屬:Flavobacterium│sp.分離基物:沉積物/深灰色沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株；產(chǎn)酶微生物/蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：非離子型

Sporosarcina│psychrophila 中文名稱：芽孢八疊球菌(加詞待譯)種屬:Sporosarcina│psychrophila分離基物:沉積物/深灰色沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:極地細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：96%

Oceanicola│nanhaiensis 中文名稱：南海海棲菌種屬:Oceanicola│nanhaiensis分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：96%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。