PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來(lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
核仁酸蛋白3(NPM3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黃蓋小脆柄菇　5g

軸突蛋白2(NRXN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　芝麻專化型　1g

軸突蛋白3(NRXN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　接骨木鐮孢　5g

神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白2(NXPH2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　雞傷寒沙門氏菌　25g

神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白3(NXPH3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　布氏白僵菌　5g

神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白4(NXPH4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　謝瓦氏曲霉　50mg

泛酸激酶2(PANK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　蘋果鏈格孢　1g

泛酸激酶3(PANK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　釀酒酵母　5g

泛酸激酶4(PANK4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　阿布拉鏈霉菌　25g

葡萄糖酸變位酶5(PGM5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　異樣纖維單胞菌　5g

酸甘露糖酶1(PMM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　瑞士乳桿菌　100g

蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶2(POMT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　橙色桿菌屬　25g

外周蛋白(PRPH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　貝倫格葡萄座腔菌梨生?；汀?00g

過(guò)氧化還原酶3(PRDX3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　豌豆根瘤菌　1g

過(guò)氧化還原酶4(PRDX4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　氧化節(jié)桿菌　5g

過(guò)氧化還原酶6(PRDX6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　細(xì)孢毛霉　1g

核糖體結(jié)合糖蛋白Ⅱ(RPN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　植物乳桿菌植物亞種　250mg

Clavesin 1蛋白(CLVS1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　吸水鏈霉菌　100g
白鱘虹彩病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白2抗體IASPP(inhibitory member of the ASPP family)  腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)100 ul

鋅指蛋白521抗體CD54 ICAM-1 (Inrcellular dhesion molecule 1; CD54 gen;)  細(xì)胞間粘附分子-1(多肽抗原)100 ul

大腸桿菌埃希桿菌O6抗體（腸致病性大腸桿菌O6）IL-1 Beta(Inrleukin-1 Beta)  白介素1β（白細(xì)胞介素-1β）(多肽抗原)100 ul

植物延展素-βIL1RAPL1 (Inrleukin 1 receptor accessory proin-like 1)  白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白（抗原）20 ul

內(nèi)皮素-1抗體IL-6(Inrleukin-6)  白介素6（白細(xì)胞介素-6）(多肽抗原)100 ul

絲裂原活化蛋白激酶4抗體IL-10(Inrleukin-10)  白介素10（白細(xì)胞介素-10）(抗原)100 ul

埃茲蛋白抗體IL-8  白介素8（白細(xì)胞介素-8）(抗原)100 ul

細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體Insulin Receptor(ISR)  胰島素受體（抗原）100 ul

內(nèi)皮素-1單克隆抗體Ingrin Alpha 4/ITGA4(Ingrin alpha 4)  整合素-α（抗原）100 ul