熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線(xiàn) (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩?lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為T(mén)aqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線(xiàn)檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類(lèi)基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線(xiàn)性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
加拿大香脂PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb甲氧基-酚

正己酸(>98%，BR)Camptothecin鹽酸莫西沙星

己內(nèi)酰(>98%，BR)Phospho-GKAP (Ser346) AntibodyN,O-1,二乙?；胚?/span>

羧肽酶 Y >50 U /mgVAMP3 Antibody溴乙

蓖麻油MED26 Antibody基酸頻哪酯

1,1-環(huán)己基二乙酸PKCθ (E1I7Y) Rabbit mAb1,二甲基二甲

反式-1,2-環(huán)己二四乙酸(>98%，BR)STING (D2P2F) Rabbit mAb并咪唑-5-甲酸甲酯

乙酸纖維素Langerin (D9H7R) XP® Rabbit mAb2,6-二溴

乙酸鈰(>99%，BR)Langerin (D9H7R) XP® Rabbit mAb反式-1,環(huán)已烷二甲

硫酸鈰四水(>99%，BR)SimpleChIP® Human β-Actin Promor Primers2-溴-5-氟甲

碳酸銫(>99%，BR)Stathmin (D1Y5A) Rabbit mAb3,5-二氯異酸酯

滂天藍(lán)(~50%,BS)IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-rminal Antigen) (Pacific Blue™ Conjuga)環(huán)乙酸

氯銨-T三水(>98%,BR)VCAM-1 (E1E8X) Rabbit mAb一水右旋美沙芬

卡拉唑黑E(>70%,BS)ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb5-乙酰-2-氟

氯金酸三水PI3 Kinase p85α (6G10) Mouse mAb溴-5-氟-2-

氯鉑酸六水MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb式醋酸鉛

乙酸膽固酯(>96%,BR)MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb基-三氟甲基吡啶

硬脂酸膽固酯(>98%,BR)SimpleChIP® Human β-Actin 3' UTR Primers(S)-二甲基氨基-
牛結(jié)節(jié)疹病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒剛地弓形蟲(chóng)(T.gondii)ELISA試劑盒GRK2/BARK1  G蛋白偶合受體激酶2抗體100 ul

肝脂酶(HL)ELISA試劑盒GRIM19  干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體100 ul

肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒GRM1  促代謝型谷氨酸受體1抗體100 ul

肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA試劑盒GRM2/GLUR2  促代謝型谷氨酸受體2抗體100 ul

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試劑盒Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876)  酸化促代謝型谷氨酸受體2抗體100 ul

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFA)ELISA試劑盒Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr876)   酸化促代謝型谷氨酸受體2抗體100 ul

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒GRM3  促代謝型谷氨酸受體M3抗體100 ul

肝細(xì)胞核因子1β(HNF-1B)ELISA試劑盒GRM4/mGluR4  促代謝型谷氨酸受體4抗體20 ul

肝素-血小板因子4復(fù)合物抗體(IgG)ELISA試劑盒GRM5/mGluR5  促代謝型谷氨酸受體5抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線(xiàn)
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線(xiàn)，即為擴(kuò)增曲線(xiàn)。熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)一般分為基線(xiàn)期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線(xiàn)期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線(xiàn)性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。