PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
釹標準溶液(1000µg/mL,基體：10%HCl)FastScan™ Total Zap-70 ELISA Kit2-氯-吡啶

標準溶液(100µg/mL,基體:1%HCl)Wnt5a Antibody5-溴-6-氯煙酸甲酯

標準溶液(1000μg/ml,,溶劑：水)PDE5 Antibody5-溴-2-氯煙酸甲酯

鐠標準溶液(1000µg/mL,基體：10%HCl)MBP Tag (8G1) Mouse mAb4,4'-二乙酰聯(lián)

硒標準溶液(100mg/L,溶劑：水)PhosphoPlus® ULK1 (Ser757) Antibody Duet氨基-基吡啶

鍶標準溶液(1000μg/ml)Vav3 Antibody2,二氯

鈦標準溶液(100µg/ml)Rap1A/Rap1B (26B4) Rabbit mAb1-(2-氟-5-基)乙-1-酮

鎢標準溶液(1000μg/ml,基體：0.1mol/LNaOH)Synip (C51G6) Rabbit mAb5-羥基-1,二

鉭標準溶液(1000μg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody2-溴噻吩-5-甲

碲標準溶液(1000μg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) AntibodyN-甲基-2-甲氧基芐

鋱標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)HSP27 (G31) Mouse mAb2-氟-6-溴

釩標準溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3)HSP27 (G31) Mouse mAb6-溴吲唑

釔標準溶液(1000μg/ml in 10% HCl)BCAR3 Antibody異基酸

鋅標準溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3)Phospho-HSP27 (Ser15) AntibodyN-CBZ-哌啶乙酸乙酯

鋅標準溶液(100µg/ml,,基體:1%HNO3)Phospho-HSP27 (Ser15) Antibody氨基基酸

氯化鋅標準溶液(0.1000mol/L)Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody2-氨基-氟

鄰二甲(for HPLC,≥96.0% (GC))Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody5-溴-2-甲氧基甲

蚜滅標準溶液(0.100mg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody II7-羥基-1H-吲唑
貓衣原體探針法熒光PCR檢測試劑盒L-腎上腺素ELISA試劑盒HCMV UL23  巨細胞病毒UL23抗體100 ul

L-酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒HCMV UL49  巨細胞病毒UL49蛋白抗體100 ul

L-氨基酸氧化酶(LAO)ELISA試劑盒MCP-1/CCL2  單核細胞趨化蛋白1抗體(大、)100 ul

Klotho ELISA試劑盒MCP-1/CCL2  單核細胞趨化蛋白1抗體()100 ul

KI-67抗原(Ki-67)ELISA試劑盒MCP-2/CCL8  單核細胞趨化蛋白2抗體（）100 ul

Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒MCP-2/CCL8  單核細胞趨化蛋白2抗體(大、)20 ul

IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)ELISA試劑盒MCP-3/CCL7  單核細胞趨化蛋白3抗體100 ul

Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)ELISA試劑盒MCP-3/CCL7  單核細胞趨化蛋白3抗體100 ul

ICOS配體(ICOSLG)ELISA試劑盒CCL9/CCL10  巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體100 ul